Публикация научных статей.
Вход на сайт
E-mail:
Пароль:
Запомнить
Регистрация/
Забыли пароль?

Научные направления
Поделиться:
Статья опубликована в №106 (июнь) 2022
Разделы: Медицина
Размещена 29.06.2022. Последняя правка: 02.08.2022.
Просмотров - 186

Динамика иммунологических показателей при применении моноклональных антител при новой коронавирусной инфекции COVID-19

Базарова Сайёра Абдубаситовна

доктор медицинских наук

Центральный военный госпиталь

начальник отделения

Амонов Эркин Иноятович, Центральный военный госпиталь, Саатов Зиёвиддин Зиядуллаевич, кандидат медицинских наук, Центральный военный госпиталь


Аннотация:
Особенности патогенеза коронавирусной-инфекции и стремительное развитие пандемии, на сегодняшний день несколько затрудняют эффективность проводимого лечения. По мере развития и распространения воспалительного процесса развивается вирусемия, то есть генерализации инфекции, секреция цитокинов приобретает неконтролируемый характер, и в сыворотке крови значительно возрастает концентрация IFNγ, IL-1, IL-6, IL-12, иными словами, первичная воспалительная реакция переходит в новую фазу — фазу цитокинового шторма. В этой связи решающее значение приобретает адекватная терапия, направленная на купирование неконтролируемого процесса, индуцированного не столько вирусемией, сколько связанным с ней воспалением. В связи с этим, целью нашего исследования было изучение влияния моноклональных антител на клинико-иммунологические показатели при новой коронавирусной инфекции.


Abstract:
One of the reasons could be the features of pathogenesis and a quick spread of the pandemic which may have made researches more complicated. As an inflammatory process develops, a generalization of infection also develops. A cytokine secretion becomes rockets up, Interferon-γ (IFN-y), interleukin-1(IL-1), interleukin-6 (IL-6), interleukin-12 (IL-12), concentration increases. To put it in other words, the primary inflammatory reaction enters a new phase — the cytokine storm phase. In this regard, adequate therapy aimed at stopping the uncontrolled process induced not so much by viremia as by the inflammation associated with it becomes crucial. Therefore, the aim of our research was to study the impact of monoclonal antibodies.


Ключевые слова:
новая коронавирусная инфекция; Covid-19; моноклональные антитела; интерлейкин-6

Keywords:
new coronavirus infection; COVID-19; monoclonal antibodies; interleukin-6


УДК 616.1/.9

Вспышка коронавирусной инфекции (CoV), названная COVID-19 (аббревиатура от слов COronaVIrus Disease) в конце 2019 и начале 2020 года получила повсеместное распространение и затронула большинство стран мира, что послужило для Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) основанием объявить пандемию CoV [1,3]. COVID-19 характеризуется высокой контагиозностью при сравнительно невысокой летальности в пределах 1–6% [4, 5]. Несмотря на почти двадцатилетнюю историю патогенных CoV, методы их профилактики и лечения вызываемых ими заболеваний до сегодняшнего дня, по существу, не разработаны. В качестве одной из причин такого положения могут быть особенности патогенеза CoV-инфекции и стремительное развитие пандемии, которые могли затруднить эффективность проводимых исследований. Как известно, первичными воротами инфекции является однослойный эпителий легочных альвеол, куда вирус может внедриться пятью разными способами [6, 16, 17]. Наиболее типичным считается связывание спайк-белка (SP) CoV с рецептором ангиотензинпревращающего фермента (ACE) [2, 8]. Кроме ACE определенное значение в процессе инвазии SARS-CoV играет CD147, известный также как, BASIGIN [11]. Наружная мембрана проникшего в эндосому вируса сливается с эндосомальной мембраной и высвобождает РНК вируса в цитоплазму, где происходит репликация вируса, сборка вирионов и целый каскад событий, сопровождающихся формированием воспалительного ответа [1, 13, 14]. Первичными отвечающими клетками, где происходит экспрессия и последующая секреция провоспалительных цитокинов, являются альвеолоциты II порядка. Наряду с секрецией IL-6, TNFα, IL-1β, IL-8, часть альвеолярного эпителия подвергается пироптотической гибели, продукты которой поглощаются гранулоцитами, моноцитами/макрофагами. Мигрировавшие поли- и мононуклеары в свою очередь активируются на дальнейшую секрецию провоспалительных цитокинов и хемокинов; одновременно с активацией воспалительных клеток наблюдается повышение проницаемости интерстициальных капилляров, что приводит к утечке из них плазмы и формированию локального отека [16, 19]. По мере развития и распространения воспалительного процесса вирус инфицирует дендритные клетки и различные субпопуляции мононуклеарных фагоцитов. При этом создаются условия для развития вирусемии, то есть генерализации инфекции, секреция цитокинов приобретает неконтролируемый характер, и в сыворотке крови значительно возрастает концентрация IFNγ, IL-1, IL-6, IL-12, иными словами, первичная воспалительная реакция переходит в новую фазу — фазу цитокинового шторма [6, 7, 18]. Клинически это проявляется гипертермией, сухим кашлем, нарастанием дыхательной недостаточности, переходящей в острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС), развиваются признаки нефропатии, а усиливающиеся гемодинамические нарушения и явления коагулопатии сопровождаются формированием диссеминированного внутрисосудистого свертывания (ДВС) [9, 10, 12, 15].

В этой связи решающее значение приобретает адекватная терапия, направленная на купирование неконтролируемого процесса, индуцированного не столько вирусемией, сколько связанным с ней воспалением

Из этого следует вполне определенная, на наш взгляд, гипотеза о том, что противовоспалительное лечение, в том числе направленное на подавление цитокинового шторма, для пациентов с COVID-19 может оказаться более приоритетной с позиции выживания, чем прямая терапия, направленная на элиминацию вируса. Одним из решений данной проблемы может стать использование иммуномодулирующей терапии, способной угнетать избыточные воспалительные реакции, восстанавливая таким образом гомеостатическую регуляцию нарушенных регуляторных функций.

В связи с этим, целью нашего исследования было изучение влияния моноклональных антител, в частности препарата «Касиривимаб + Имдевимаб» — комбинация рекомбинантных моноклональных антител, направленных против S-белка на клиническое течение и лабораторные данные у больных с новой коронавирусной инфекцией –Covid-19.

Научная новизна выражается в том, что применение моноклональных антител на ранних этапах заболевания новой коронавирусной инфекции, способствует быстрому выздоровлению, без применения дополнительных лекарственных препаратов. А также предупреждает развитие цитокинового шторма.

Материалы и методы

Обследовано 32 пациента с легким и со среднетяжелым течением новой коронавирусной инфекции в возрасте от 32 до 57 лет (44,5 ±5,2 лет), с длительностью заболевания не более 3х дней. Методом случайной выборки были сформированы 2 группы. Больные основной группы (n=15), получали антиагрегантную (ацетилсалициловая кислота 75 мг/сут), противовоспалительную (парацетамол 1000 мг/сут), антиоксидантную (аскорбиновая кислота 5%-10,0 мл/сут) терапию, а также комбинацию моноклональных антител, препарат «Казиривимаб 1200 мг/мл + Имдевимаб 1200 мг/мл» в/в, капельно, однократно.  Группа сравнения (n=17) получала также антиагрегантную, противовоспалительную, антиоксидантную, противовирусную (Ремдесивир 100 мг по схеме) терапию в соответствие с временными стандартами по лечению новой коронавирусной инфекции Covid-19. В качестве контроля обследовано 10 практически здоровых лиц. Состояние иммунной системы оценивали до лечения и на пятый день лечения по  следующим показателям: изменение содержания интерлейкина-6, прокальцитонина, ферритина, Д-димера, С-реактивного белка в сыворотке крови. Содержание интерлейкинов, прокальцитонина и Д-димера определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа. Использовались наборы реактивов для иммуноферментного анализа цитокинов человека фирмы "Вектор - Бест" (Новосибирск). Исследование в крови ферритина проводилась методом Иммунотурбидиметрии. Содержание СРБ исследовалось общими клиническими методами. Полученные данные обработаны на персональном компьютере, в программной среде Microsoft Excel с использованием встроенного "Пакета анализа", специально предназначенного для решения статистических задач.

Результаты

Исходные данные у больных обеих групп были сопоставимы (р>0,05) и характеризовались достоверным увеличением содержания IL-6, ферритина, СРБ, Д-димера в сыворотке крови больных.  При этом увеличение  IL-6 было более выраженным по сравнению с другими сравниваемыми показателями.  Известно что, по своим свойствам ИЛ-6 относится к группе провоспалительных интерлейкинов, и способен вызывать активацию и хемотаксис лейкоцитов в ответ на инфицирование. Связь повышенного уровня ИЛ-6 в сыворотке крови у пациентов с новой коронавирусной инфекцией описывают ряд исследователей, объясняя это наличием персистирующей вирусной инфекции у данной категории больных. Полученные нами данные, соотносятся с результатами этих исследований и позволяют сделать вывод, что на ранних стадиях заболевания  новой коронавирусной инфекцией, вне клинических проявлениях, повышение содержания ИЛ-6 является ранним показателем начала воспалительного процесса. Эффективность лечения при включении комбинации рекомбинантных моноклональных антител - препарата «Казиривимаб + Имдевимаб» клинически проявлялась  отсутствием начала проявления  клинических симптомов. А также у пациентов с признаками катарального воспаления верхних дыхательных путей (ринорея, першение и боль в горле), симптомы исчезали на 2-3 сутки лечения, без применения противовирусных и антибактериальных препаратов.  Содержание IL-6,  на фоне препарата «Казиривимаб + Имдевимаб»  к контрольному сроку (5 дней от начала терапии)  в основной группе достоверно снизилось (р<0,05). Изменения  этих показателей в контрольной группе  были не столь выражены и носили недостоверный характер          (Таблица 1).

Содержание ферритина имело тенденцию к снижению. Содержание СРБ и Д-димера  исходно на ранних стадиях заболевания имело тенденцию к повышению, но к контрольному сроку содержание этих показателей были в пределах нормы. Изменения  этих показателей в группе сравнения  были  не столь выражены и носили недостоверный характер. К тому же в группе сравнения отмечалось некоторое увеличение показателей  СРБ, Ферритина, клинические признаки катарального воспаления верхних дыхательных путей усиливалась. В связи с чем, в дополнении к лечению после 5го дня, приходилось включать противовирусную, антибактериальную, а также глюкокортикостероидную терапию по индивидуальным показаниям. Включение в состав комплексной терапии препарата «Казиривимаб + Имдевимаб» способствовало более раннему  и достоверному снижению содержания  интерлейкина-6 (Таблица 1).

Динамика иммунологических и клинических показателей в крови на фоне лечения.

Таблица 1

 

 

Показатели

Основная группа

 (n= 15)

Группа сравнения (n=17)

Контрольная группа

(n=10)

До

После

До

После

 

1

IL-6    ( пг/мл)

13,16+2,7

9,77 +0,8*

14,7+1,5

19,8+2,3*,**

5,3 +  0,2

2

Ферритин   ( пг/мл)

587,3+8,6

450,2+9,8*

568,5+8,4

565,2+9,1*,**

154,6 + 5,1

 

Д-димер (пг/мл)

1,1+0,02

0,29+0,01*

1,2+0,02

1,5+0,01*,**

0,31 + 0,03

 

СРБ

5,3+2,7

3,2+1,5*

5,8+1,7

8,2+1,2*,**

2,75+0,3

Примечание:                   

*-уровень достоверности исходных данных р< 0,05,

**- уровень достоверности данных между группами р< 0,05.

При изучении показателей общего анализа  крови, в частности лейкоформулу, у обследуемых значительных изменений не наблюдалось. Изначально отмечалось некоторое снижение общего пула лейкоцитов, в динамике лечение наблюдался относительный подъем показателей. Но так как в исследовании мы изучали ранние маркеры воспаления, а показатели лейкоформулы менялись на 5-6 дни заболевания, эти показатели в исследования не были включены. 

Заключение

Таким образом исследование продемонстрировало, положительный эффект применения моноклональных антител на ранних стадиях заболевания, которое проявлялось отсутствием или исчезновением клинических признаков заболевания, достоверным снижением интерлейкина-6, а также тенденцией к снижению ферритина, Д-димера, СРБ в крови. Вышеописанные данные показывают, что моноклональные антитела реагируют мгновенно, целенаправленно  срывая дальнейший каскад воспалительных реакций, также даёт возможность обходиться без применения противовирусных и антибактериальных препаратов. Показатели группы сравнения, которые к контрольному сроку имели тенденцию к повышению ёще раз подтвердили эффективность применения моноклональных антител. Полученные предварительные положительные  результаты диктуют необходимость  дальнейшего изучения механизмов  влияния моноклональных антител в комплексной терапии новой коронавирусной инфекции Covid-19 и возможности  их профилактического  использования.

Библиографический список:

1. Смирнов В.С., Тотолян Арег А. Врожденный иммунитет при коронавирусной инфекции // Инфекция и иммунитет. 2020. Т. 10, № 2. С. 259–268.
2. Соколова Т.М., Полосков В.В., Шувалов А.Н., Бурова О.С., Соколова З.А. Сигнальные TLR/RLR-механизмы иммуномодулирующего действия препаратов ингавирин и тимоген // Российский биотерапевтический журнал. 2019. Т. 18, № 1. С. 60–66.
3. Aguiar J.A., Tremblay B.J.-M., Mansfield M.J., Woody O., Lobb B., Banerjee A., Chan-diramohan A., Tiessen N., DvorkinGheva A., Revill S., Miller M.S., Carlsten C., Organ L., Joseph C., John A., Hanson P., McManus B.M., Jenkins G., Mossman K., Ask K., Doxey A.C., HirotaJ.A. Gene expression and in situ protein profiling of candidate SARS-CoV-2 receptors in human airway epithelial cells and lung tissue. bioRxiv, 2020
4. Anastassopoulou C., Russo L., Tsakris A., Siettos C. Data-based analysis, modelling and forecasting of the COVID-19 outbreak. PLoS One, 2020, vol. 15, no. 3: e0230405.
5. Battegay M., Kuehl R., Tschudin-Sutter S., Hirsch H.H., Widmer A.F., Neher R.A. 2019-novel Coronavirus (2019-nCoV): estimating the case fatality rate — a word of caution. Swiss Med. Wkly, 2020
6. Casadevall A., Pirofski L.J. The convalescent sera option for containing COVID-19. Clin. Invest., 2020, vol. 130, no. 4, pp. 1545– 1548.
7. Chen L., Xiong J., Bao L., Shi Y. Convalescent plasma as a potential therapy for COVID-19. Lancet. Infect. Dis., 2020, vol. 20, no. 4, pp. 398–400.
8. Cowling B.J., Park M., Fang V.J., Wu P., Leung G.M., Wu J.T. Preliminary epidemiological assessment of MERS-CoV outbreak in South Korea, May to June 2015 separator commenting unavailable. Euro Surveil., 2015, vol. 20, no. 25.
8. Feldmann M., Maini R.N., Woody J.N., Holgate S.T., Winter G., Rowland M., Richards D., Hussell T. Trials of anti-tumour necrosis factor therapy for COVID-19 are urgently needed. Lancet, on line, 2020 April 09.
9. Guo C., Li B., Ma H., Wang X., Cai P., Yu Q., Zhu L., Jin L., Jiang C., Fang J., Liu Q., Zong D. Zhang W., Lu Y., Li K., Gao X., Fu B., Liu L., Ma X., Weng J., Wei H., Jin T., Lin J., Qu K. Tocilizumab treatment in severe COVID-19 patients attenuates the inflammatory storm incited by monocyte centric immune interactions revealed by single-cell analysis. bioRxiv, 2020: 029769.
10. Guo Y.R., Cao Q.D., Hong Z.S., Tan Y.Y., Chen S.D., Jin H.J., Tan K.S., Wang D.Y.,Yan Y. The origin, transmission and clinical therapies on coronavirus disease 2019 (COVID-19) outbreak — an update on the status. Mil. Med. Res., 2020, vol. 7, p. 11.
11. Huang X., Wei F., Hu L., Wen L., Chen K. Epidemiology and clinical characteristics of COVID-19. Arch. Iran Med., 2020, vol. 23, no. 4, pp. 268–271.
12. Lai C.C., Shih T.P., Ko W.C., Tang H.J., Hsueh P.R. Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) and coronavirus disease-2019 (COVID-19): the epidemic and the challenges. Int. J. Antimicrob. Agents., 2020, vol. 17: 105924.
13. Li X., Geng M., Peng Y., Meng L., Lu S. Molecular immune pathogenesis and diagnosis of COVID-19. J. Pharm. Anal., 2020 Mar 5.
14. Shanmugaraj B., Siriwattananon K., Wangkanont K., Phoolcharoen W. Perspectives on monoclonal antibody therapy as potential therapeutic intervention for Coronavirus disease-19 (COVID-19). Asian Pac. J. Allergy Immunol., 2020, vol. 38, no. 1, pp. 10–18.
15. Sohrabi C., Alsafi Z., O’Neill N., Khan M., Kerwan A., Al-Jabir A., Iosifidis C., Agha R. World health organization declares global emergency: a review of the 2019 novel coronavirus (COVID-19). Int. J. Surg., 2020, vol. 76, pp. 71–76.
16. Velavan T.P., Meyer C.G. The COVID-19 epidemic. Trop. Med. Int. Health., 2020, vol. 25, no.3, pp. 278–280.
17. Wang C., Li W., Drabek D., Okba N.M.A., van Haperen R., Osterhaus A.D.M.E., van Kuppeveld F.J.M., Haagmans B.L., Grosveld F., Bosch B.-J. A human monoclonal antibody blocking SARS-CoV-2 infection. Nat. Commun., 2020, vol. 11: 2251.
18. Yin S., Huang M., Li D., Tang N. Difference of coagulation features between severe pneumonia induced by SARS-CoV2 and non-SARS-CoV2. J. Thromb. Thrombolysis, 2020, vol. 3, pp. 1–4.
19. Zhang W., Zhao Y., Zhang F., Wang Q., Li T., Liu Z., Wang J., Qin Y., Zhang X., Yan X., Zeng X., Zhang S. The use of antiinflammatory drugs in the treatment of people with severe coronavirus disease 2019 (COVID-19): the experience of clinical immunologists from China. Clin. Immunol., 2020: 108393.




Рецензии:

25.07.2022, 13:51 Турсунова Нодира Исроиловна
Рецензия: С моей точки зрения надо добавить к статье следующие пункты: 1. После результатов надо добавить абзац "Обсуждения", где надо сравнить свои результаты с исследователями из других стран по данной тематике. 2. В резултатах нужно так же выдать результаты больных по общему развернутому анализу крови, а именно уровень лейкоцитов и СОЭ. 3. Добавить также отдалённые результаты анализов крови воспалительных реакции при выписке больных или через 1 месяц. 4. Какие побочные эффекты наблюдались при применение моноклональных антител у больных в основной группе? После исправление вышеуказанных замечаний я рекомендую статью на публикацию.

31.07.2022 21:21 Ответ на рецензию автора Базарова Сайёра Абдубаситовна:
Уважаемая Нодира Исроиловна, спасибо Вам за рецензирование нашей статьи. Ваше замечания учтены. Дело в том что, по данному препарату схожих исследований не много, поэтому мы указали их в введении и в списке литературы. Отдаленных результатов у нас пока нет, они дорабатываются и будут опубликованы в следующих публикациях.



Комментарии пользователей:

Оставить комментарий


 
 

Вверх