Публикация научных статей.
Вход на сайт
E-mail:
Пароль:
Запомнить
Регистрация/
Забыли пароль?
Международный научно-исследовательский журнал публикации ВАК
Научные направления
Поделиться:
Статья опубликована в №42 (февраль) 2017
Разделы: Медицина
Размещена 10.02.2017. Последняя правка: 28.03.2017.

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА СПОНТАННОЙ И ИНДУЦИРОВАННОЙ МОКРОТЫ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

Базарова Сайёра Абдубаситовна

доктор медицинских наук

АО "Республиканский специализированный научно-практический медицинский центр терапии и медицинской реабилитации"

Руководитель научного гранта

Утемуратов Бабур Бахрамович младший научный сотрудник АО Республиканский специализированный научно-практический медицинский центр терапии и медицинской реабилитации


Аннотация:
Характер воспаления в бронхах можно оценить путем исследования биопсийного материала слизистой бронхов и лаважной жидкости, полученных при фибробронхоскопии. Однако это инвазивные процедуры, и они не могут повторяться многократно. Альтернативой могут быть неинвазивные методы получения материала для исследований, к которым относится получение бронхиального секрета путем индуцирования мокроты. По данным исследования, можно сделать вывод что, исследование биомаркеров воспаления у больных БА с помощью неинвазивного метода индуцированной мокроты является безопасным и высокоинформативным, при оценке состояния больных, для определения фенотипов БА, и для контроля эффективности проводимой противовоспалительной терапии.


Abstract:
Character of an inflammation in bronchial tubes can be estimated by research biopsy material from mucous bronchial tubes and the liquids from bronchi, received by bronchoscopy. However it invasion procedures, and they cannot repeatedly repeat. Noninvasive methods of reception of a material for researches can be alternative. According to research, it is possible to draw a conclusion that, research of biomarkers of an inflammation at patients BА by means of a noninvasive method induced sputum is safe and high informative, at an estimation of a condition of patients, for definition of phenotypes BА, and for definition of efficiency of spent anti-inflammatory therapy.


Ключевые слова:
бронхиальная астма; спонтанная мокрота; индуцированная мокрота.

Keywords:
bronchial asthma; spontaneous sputum; induced sputum.


УДК: 616.248-008.8-616-0765

      Бронхиальная астма (БА) является одним из самых частых заболеваний респираторного тракта во всех возрастных группах  [1]. БА – прежде всего хроническое воспалительное заболевание, поэтому большая роль отводится методам изучения воспаления [2]. Хроническое воспаление респираторного тракта приводит к ремоделированию нижних дыхательных путей и сосудов легких. Сегодня известно, что гладкомышечные клетки бронхов являются не только структурными и контрактильными компонентами дыхательной системы, но и способны вырабатывать большое количество провоспалительных и митогенных факторов. Увеличение размера и количества сосудов внутри и снаружи мышечного слоя бронхов, так и гиперемия бронхиального сосудистого русла участвуют в ремоделировании стенок бронхов у больных хроническими воспалительными заболеваниями дыхательных путей. В последующем ангиогенез и гиперемия сосудов усиливаются, замыкая патофизиологический круг ремоделирования. В результате наблюдается сужение бронхов и их гиперреактивность и транссудация провоспалительных медиаторов, цитокинов и факторов роста. Отек стенки бронхов способствует аккумуляции гладкомышечных клеток бронхиальной стенки. Ведущим патоморфологическим признаком при бронхиальной астме является воспаление в сочетании со структурными нарушениями дыхательных путей.
     Актуальность проблемы. Предложено к практическому применению много  эффективных  методов  изучения  воспалительного процесса в респираторном тракте. По большей части это  инвазивные методики, что затрудняет их широкое  использование  в практике наблюдения за воспалительным бронхиальным процессом [9]. Характер воспаления в бронхах можно оценить путем исследования биопсийного материала слизистой бронхов и лаважной жидкости, полученных при фибробронхоскопии. Однако это инвазивные процедуры, и они не могут повторяться многократно. В комплексе диагностических мероприятий анализ мокроты помогает установить характер патологического процесса в органах дыхания, а в ряде случаев определить его этиологию. В последнее время большое внимание уделяется методам неинвазивной оценки наличия и выраженности воспаления в бронхиальном дереве, к которым относится метод индуцированной мокроты (ИМ). Достоинствами метода ИМ являются помимо неинвазивности, доступность и дешевизна, отсутствие противопоказаний и побочных эффектов, возможность оценить участвующие в воспалении клеточные элементы, провоспалительные цитокины и другие растворимые компоненты, а также метаболиты оксида азота. Изучение цитологического состава ИМ может дать возможность не менее оперативно и достоверно судить об активности патологических процессов в дыхательных путях, чем эндоскопическое исследование бронхов с взятием биопсии и бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ). [7, 8].
  Признано, что индуцированная мокрота отражает процессы, происходящие в бронхах, и может быть использована для изучения клеточных и внеклеточных показателей воспаления [3, 4, 6]. Изучение компонентов индуцированной мокроты при хронических воспалительных заболеваниях легких представляется чрезвычайно важным, так как они доступны и информативны для оценки воспалительного процесса [5,7,12].  Достоинствами  этого метода при высокой  достоверности являются простота  выполнения, неинвазивность  и  относительная безопасность, а также возможность многократность выполнения. Большое значение отводится индуцированию и цитологическому исследованию мокроты у пациентов с ХОБЛ. Предложение использовать  методику  исследования индуцированной мокроты,  для оценки воспаления при бронхиальной астме,  было высказано в исследовании  Pin I. et al [9]. Согласно данным многочисленных  исследований  клеточный состав индуцированной мокроты характеризуется высоким содержанием эозинофилов, нейтрофилов, макрофагов и низким содержанием лимфоцитов. В некоторых работах указывается, что при относительно идентичных показателях клинического состояния больных бронхиальной астмой   обнаруживается  совершенно  разное  количество  эозинофилов в индуцированной мокроте (по данным  Pin I. с соавторами -  3,8%, Fujimoto К. c соавторами – 39,4%).  Отмечается и вариабельность количества нейтрофилов индуцированной мокроты от 7,5 до 30,5% по данным различных исследователей.  Вероятно, различия в содержании нейтрофилов отражают степень  активности процесса, по тому, как  первыми реагируют на патогенный агент эффекторные клетки  [11,13,14]. В современных  публикациях имеются данные  о сопоставимых изменениях клеточного состава бронхиального секрета, полученного трахеобронхофиброскопией  и методом индуцированной мокроты. Это  подтверждает диагностическую ценность последнего  [10].

 Целью исследования является сравнительная оценка информативности изучения спонтанной и индуцированной мокроты у больных бронхиальной астмой.

Материалы и методы
В исследование было включено 80 пациентов  со среднетяжелой БА (GINA, 2007 г) в возрасте от 20 до 56 лет (35,5 ±4,2 лет) с длительностью заболевания в среднем 15+2,3 лет.  Были сформированы 2 группы по фенотипическим различиям. Первая группа 48 больных в возрасте 42-56 лет (48 + 4,6 лет),  с  инфекционно зависимой БА (ИБА), вторая группа 32 больных в возрасте 20-35 лет (27,5 + 3,5 лет) с атопической БА (АБА). Для определения фенотипов учитывались подробный анамнез, данные клинического осмотра, результаты клинических исследований, содержание общего иммуноглобулина Е (IgE). Критериями исключения пациентов из исследования являлись следующие показатели: наличие острого или хронического неаллергического воспаления в бронхах; наличие острой или хронической патологии сердечнососудистой системы в анамнезе; курение.
У обеих групп пациентов изучался цитологический состав спонтанной (утренней) мокроты а также индуцированной мокроты. Для получения индуцированной мокроты пациентам проводилось небулирование 1 % гипертоническим раствором NaCI, распыляемым компрессорным небулайзером Little doctor LD-210С (Сингапур) по методу Pin et al. (1992 г.) Цитологическое исследование мокроты проводили путем предварительного окрашивания гемотоксилин-эозином и последующим подсчетом лейкоформулы в клинической лаборатории. Статистическая обработка результатов исследования проводилась при помощи пакета прикладных программ «Statistica for Windows StatSoft Inc. Версия 6.0».
Результаты исследования и их обсуждение
Исследование клеточного состава мокроты показало следующее: в первой группе больных (n=48) в спонтанной мокроте основную массу составили нейтрофилы (88+1,2%), с незначительным уровнем лимфоцитов (2,8+1,1%), а также  содержание эозинофилов составило 10,7+0,9%. Во второй группе больных (n=32) в спонтанной мокроте превалировали эозинофилы (85,3+2,3%), с меньшим количеством нейтрофилов (8,8+1,3%) и наличием незначительного уровня лимфоцитов (5,9+1,1%). Клеточный состав мокроты первой и второй группы резко отличался. (Таблица 1)

Таблица 1. Цитологический состав спонтанной мокроты (% клеток)

Пациенты

Нейтрофилы

Эозинофилы

Лимфоциты

Первая группа (n=48)

88+1,2*

10,7+0,9*

2,8+1,1*

Вторая группа  (n=32)

8,8+1,3*

85,3+2,3*

5,9+1,1*

Примечание: достоверность различия между первой (ИБА) и второй (АБА) группой  * - p<0,01.

У больных с ИБА в мокроте превалирует нейтрофилия (таблица 1), что доказывает инфекционный характер воспаления. У больных при АБА в мокроте превалирует эозинофилия, что соответственно отражает воспаление аллергического генеза. 
При изучении клеточного состава индуцированной мокроты (таблица 2) в обеих группах установлено, что отсутствуют значительные различия по цитологическому составу со спонтанной мокротой. Отличия носят не достоверный характер.

Таблица 2. Цитологический состав индуцированной мокроты (% клеток)

Пациенты

Нейтрофилы

Эозинофилы

Лимфоциты

Первая группа (n=48)

89+1,1*

9,8+0,8*

1,8+1,2*

Вторая группа  (n=32)

7,8+1,3*

86,5+2,1*

4,9+1,2*

Примечание: достоверность различия между первой (ИБА) и второй (АБА) группой  * - p<0,01.

При не продуктивном кашле или трудноотделимой мокроте  (из за вязкости слизи) рекомендуется проводить индуцирование мокроты, с последующим цитологическим изучением, что отражает однонаправленные изменения со спонтанной.
Заключение.
На основании результатов исследования, установлено что, исследование биомаркеров воспаления у больных БА с помощью неинвазивного метода индуцированной мокроты является высокоинформативным для оценки клинического течения БА с определением фенотипов БА, и эффективности проводимой противовоспалительной терапии, прогнозирования обострений и является безопасным, не трудоёмким, материально доступным.
Процедура индуцирования мокроты не влияет на относительное содержание в ней клеток. Спонтанно выделенная мокрота у пациентов с БА является высокоинформативным для количественной характеристики воспаления в бронхах.  Индуцированная мокрота по количественному составу не имеет существенных различий. Исследование индуцированной мокроты позволяет прямым и неинвазивным методом получить количественную оценку выраженности и характера бронхиального воспаления и может быть рекомендовано для этих целей. Таким образом, оба варианта исследования лейкоцитарной формулы мокроты (в спонтанно выделенной или индуцированной мокроте) могут использоваться на равных условиях. 

Библиографический список:

1. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма и астмаподобные состояния // Пульмонологія. – 2007. – № 11. – С. 1–9.
2. Фещенко Ю. И. Новая редакция глобальной инициативы по ХОЗЛ //Український пульмонологічний журнал. – 2012. – Т. 2. – С. 6-8.
3. Жаков Я. И. и др. Изменение цитоиммунологического профиля у детей, получающих ингаляционные глюкокортикостероиды (по данным индуцированной мокроты) //Consilium medicum. – 2008. – №. 10. – С. 30-34.
4. Федосенко С. В. и др. Характеристика нейтрофилов и макрофагов индуцированной мокроты больных хронической обструктивной болезнью легких на фоне базисной терапии //Бюллетень сибирской медицины. – 2011. – Т. 10. – №. 6.
5. Цыпленкова С. Э., Мизерницкий Ю. Л. Современные возможности функциональной диагностики внешнего дыхания у детей //Рос вестн перинатол и педиатр. – 2015. – Т. 5. – С. 14-20.
6. Induced sputum cell counts: their usefulness in clinical practice / L. Jayaram, K. Parameswaran, M.R. Sears, F.E. Hargreave // Eur. Respir. J. — 2000. — № 16.-P. 150-158.
7. Patterson R. N. et al. Increased tachykinin levels in induced sputum from asthmatic and cough patients with acid reflux //Thorax. – 2007. – Т. 62. – №. 6. – С. 491-495.
8. van Woerden H. C. et al. Differences in fungi present in induced sputum samples from asthma patients and non-atopic controls: a community based case control study //BMC infectious diseases. – 2013. – Т. 13. – №. 1. – С. 69.
9. Fehervari Z. Alveolar macrophages in asthma //Nature immunology. – 2015. – Т. 16. – №. 1. – С. 64.
10. Shaw D. E. et al. The use of exhaled nitric oxide to guide asthma management: a randomized controlled trial //American journal of respiratory and critical care medicine. – 2007. – Т. 176. – №. 3. – С. 231-237.
11. Прибылов С.А., Жидких Б.Д., Прусакова О.Ю., Мустак Али. Лёгочная гипертензия и диастолическая дисфункция сердца у больных бронхиальной астмой и ХОБЛ пожилого возраста // Курск. науч.-практ. вестн. «Человек и его здоровье». - 2009. - № 4. - С. 80-89.
12.Ненашева Н. М. Фенотипы бронхиальной астмы и выбор терапии //Практическая пульмонология. – 2014. – №. 2.
13.Mineev V. N. et al. Фенотип бронхиальной астмы с ожирением. – 2012.
14.Жаков Я. И. и др. Клиническое значение исследования цитоиммуно-логических показателей индуцированной мокроты при бронхиальной астме у детей в возрасте до 5 лет //Вопр практ педиат. – 2010. – Т. 1. – С. 8-12.




Рецензии:

10.02.2017, 20:23 Шевела Татьяна Леонидовна
Рецензия: Статья "СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА СПОНТАННОЙ И ИНДУЦИРОВАННОЙ МОКРОТЫ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ" посвящена актуальной проблеме диагностики и лечения пациентов с бронхиальной астмой. Статья может быть опубликована, после добавления раздела "Цель работы" и "Результаты". В библиографический список литературы возможно добавить более новые публикации.

15.02.2017 7:07 Ответ на рецензию автора Базарова Сайёра Абдубаситовна:
Спасибо Татьяна Леонидовна за рецензирование нашей статьи. Отмеченные Вами замечания мы исправили.

11.02.2017, 8:27 Розыходжаева Гульнора Ахмедовна
Рецензия: Несмотря на актуальность рассматриваемой авторами проблемы, необходимо статья пересмотреть в плане общепринятой структуры для оригинальных исследований (актуальность, цель исследования, материал и методы, результаты и их обсуждение, выводы, список литературы (за последние 5-10 лет). Необходимо исправить грамматические и стилистические ошибки. Пересмотреть статистические данные. Причем тут здоровые лица???. Статья требует серьезной доработки.
14.02.2017 8:08 Ответ на рецензию автора Базарова Сайёра Абдубаситовна:
Спасибо Гульнора Ахмедовна за рецензирование нашей статьи. Отмеченные Вами замечания мы исправили.

14.02.2017, 8:20 Зияева Шахида Тулаевна
Рецензия: Статья "СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА СПОНТАННОЙ И ИНДУЦИРОВАННОЙ МОКРОТЫ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ" посвящена актуальной проблеме диагностики больных с бронхиальной астмой. На основании полученных данных по результатам, авторы достигли цели по поставленным задачам и по практической ценности работа соответствует требованиям редакции журнала и после исправления грамматических и стилистических ошибок статья может быть опубликовано.
15.02.2017 7:07 Ответ на рецензию автора Базарова Сайёра Абдубаситовна:
Спасибо Шахида Тулаевна за рецензирование нашей статьи! Отмеченные Вами недостатки мы устранили.

14.02.2017, 8:30 Зияева Шахида Тулаевна
Рецензия: Рецензия: Статья "СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА СПОНТАННОЙ И ИНДУЦИРОВАННОЙ МОКРОТЫ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ" посвящена актуальной проблеме диагностики больных с бронхиальной астмой. На основании полученных результатов, авторы достигли цели по поставленным задачам, и после исправления грамматических и стилистических ошибок статья может быть опубликована.
15.02.2017 7:07 Ответ на рецензию автора Базарова Сайёра Абдубаситовна:
Спасибо Шахида Тулаевна за рецензирование нашей статьи! Отмеченные Вами недостатки мы исправили.

28.03.2017, 2:19 Походенько-Чудакова Ирина Олеговна
Рецензия: Р Е Ц Е Н З И Я на статью С.А. Базаровой, Б.Б. Утемуратова «Сравнительное изучение цитологического состава спонтанной и индуцированной мокроты у больных бронхиальной астмой» Представленная статья «Сравнительное изучение цитологического состава спонтанной и индуцированной мокроты у больных бронхиальной астмой» посвящена актуальному вопросу – сравнительной оценке информативности исследования спонтанной и индицированной мокроты у больных бронхиальной астмой. Актуальность данной работы подчеркивает распространенность рассматриваемого заболевания и значительное число его осложнений. Статья построена по принципу оригинального исследования и состоит из: рефератов на русском и английском языках; кода УДК; введения, обосновывающего актуальность представленной работы; цели; раздела, содержащего материалы и методы исследования, раздела, включающего собственные результаты и их обсуждение; заключения; библиографического списка, содержащего 14 наименований (8 - на русском, 1 - на украинском и 5 - на английском языке). Следует подчеркнуть, что 7 (50%) из них (4 – на русском языке, 1 – на украинском и 2 – на английском языке) представляют собой работы, опубликованные по рассматриваемому вопросу за последние 5 лет. Материал, представленный в публикации, изложен автором последовательно, логично, грамотно, легко читается и хорошо воспринимается. Достоверность полученных в исследовании результатов не вызывает сомнений, так как использованные объекты и методы в полной мере соответствуют заявленной цели и способствуют ее достижению, а статистическая обработка полученных данных выполнена современного пакета прикладных программ. Статью завершает логично вытекающее из представленного материала заключение. Работу иллюстрируют 2 таблицы, представление которых уместно и обосновано. В тоже время к представленной публикации имеются отдельные замечания (следует устранить опечатки): &#8722; в русском варианте аннотации (в конце первой строки) удалить «-» в слове «биоп-сийного»; &#8722; непостредственно в тексте статьи (3 строка вниз после кода УДК) – следует вставить пробел после «[2].»; &#8722; в разделе «Актуальность проблемы», во втором предложении – следует вставить пробел после «…воспалительным бронхиальным процессом» и «[9].»; &#8722; пункты библиографического списка (12, 13, 14), должны быть напечатаны каждый с новой строки. При этом следует подчеркнуть, что указанные замечания не носят принципиального характера, являются легко устранимыми, и не снижает общей положительной оценки публикации. Кроме того, считаю необходимым отметить, что авторами проведена значительная доработка статьи в соответствии с замечаниями, сделанными уважаемыми предыдущими рецензентами, что также является положительным моментом. На основании изложенного выше, считаю возможным заключить, что статья С.А. Базаровой, Б.Б. Утемуратова «Сравнительное изучение цитологического состава спонтанной и индуцированной мокроты у больных бронхиальной астмой» соответствует профилю электронного журнала «SCI-ARTICLE.RU» и может быть рекомендована к публикации. Заведующая кафедрой хирургической стоматологии учреждения образования «Белорусский государственный» медицинский университет», доктор медицинских наук, профессор И.О. Походенько-Чудакова 28 марта 2017 года
28.03.2017 7:07 Ответ на рецензию автора Базарова Сайёра Абдубаситовна:
Уважаемая Ирина Олеговна, благодарим Вас за рецензирование нашей статьи. Отмеченные Вами замечания мы исправим.



Комментарии пользователей:

28.03.2017, 11:27 Шевела Татьяна Леонидовна
Отзыв:  Представленная статья является актуальной по рассматриваемой проблеме. Написана в соответствии с требованиями предъявляемыми к научной статье.Статья может быть опубликована.


28.03.2017, 13:03 Базарова Сайёра Абдубаситовна
Отзыв: Уважаемая Татьяна Леонидовна, благодарим Вас за положительный отзыв!


Оставить комментарий


 
 

Вверх